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HPLC法測定寧夏產四種柴胡中kaerophyllin的含量

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摘要 HPLC法測定寧夏產四種柴胡中木脂素類成分(kaerophyllin)的.含量,用甲醇提取後進樣。色譜條件:ODS-C18柱 (150mm×6mm),流動相為甲醇-水(70∶30),測定波長328nm。結果表明寧夏產小葉黑柴胡、短莖柴胡、空心柴胡、秦嶺柴胡中均含有 kaerophyllin。

HPLC法測定寧夏產四種柴胡中kaerophyllin的含量

關鍵詞:HPLC法;kaerophyllin;寧夏產柴胡

我國有20餘種柴胡屬植物供藥用,寧夏有10種〔1〕均含有柴胡皁苷a.d。小葉黑柴胡中有較高含量的木脂素類成分,是區別於北柴胡的顯著特點〔2〕。為系統地考察柴胡的質量,筆者對寧夏產四種柴胡中Kaerophyllin進行了含量測定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 LC-6A高效液相色譜儀(日本)。

1.2 試藥 Kaerophyllin(日本東邦大學藥學部分離,經UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR鑑定);柴胡〔採集於寧夏固原縣,寧夏藥品檢驗所邢世瑞主任藥師鑑定為:北柴胡(ense DC),小葉黑柴胡(hii wolff ifolium Shan et ),短莖柴胡(llum Krylov),空心柴胡(icaule chelii Boiss),秦嶺柴胡(icaule ldii wolff)〕。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱Shimpack CLC-ODS-C18(150mm×6mm),流動相:甲醇-水(70∶30),流速1ml/min,進樣量15μl,檢測波長328nm。

2.2 標準曲線 精密稱取Kaerophyllin 5mg,用甲醇溶解定容於10ml量瓶中,製成標準溶液;精密吸取2,6,10,14,18μl注入高效液相色譜儀,以進樣量對峰高迴歸得方程為 Y=0.065+0.346C(r=0.9961),線性範圍為1~9μg。

2.3 回收率試驗 精密稱取北柴胡粉末0.5g,加入Kaerophyllin 1.0260mg,用甲醇25ml 40℃溫浸20min後,超聲提取30min,過濾;重複兩次,揮去甲醇,再用甲醇4ml溶解後;過濾,置5ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,微孔濾膜過濾(0.45μm);取濾液進樣15μl,計算回收率為97.1%,RSD=2.1%(n=5)。
2.4 樣品含量測定 精密稱取4種柴胡粉末各0.5g。用甲醇25ml 40℃溫浸20min後,按上述條件進行樣品製備和含量測定,結果見圖1、表1。

3 小結

寧夏產小葉黑柴胡、短莖柴胡、秦嶺柴胡、空心柴胡均含有Kaerophyllin,且含量較高,北柴胡中只有痕量。該實驗對綜合評價柴胡的質量具有參考價值。

表1 各柴胡中Kaerophyllin的含量(n=5)

藥  材 Kaerophyllin(%) 北柴胡 痕量 小葉黑柴胡 0.53 短莖柴胡 0.76 秦嶺柴胡 0.39 空心柴胡 0.21

A-kaerophyllin B-小葉黑柴胡 C-短莖柴胡
D-空心柴胡 E-秦嶺柴胡

參考文獻

〔1〕 邢世瑞主編.寧夏中藥資源.銀川:寧夏人民出版社,1987:47
〔2〕 尚明遠,袁本香,王英華,等法測定寧夏產柴胡中柴胡皁苷a.d的含量.西北藥學雜誌,1998,13(4):153
〔3〕 王英華,尚明遠,邢世瑞,等.小葉黑柴胡化學成分比較研究簡報.寧夏醫學雜誌,1996,18(增刊):9